（更正一下：之前的流速设置有问题，现改为30毫升每分钟，而不是1毫升每分钟，实验室采用的是高压液相色谱。）
几分钟后，流动相运行平稳，进出硅胶柱的细管中充满了液体，不再存在气泡。
目前样品柱中的样品岿然不动，并没有在溶剂的裹挟下向下移动，这是因为当前的溶剂为纯石油醚，极性非常小。
许秋打开紫外检测器，设置5分钟后A：B的体积比为也就是缓慢增大流动相的极性。
流动相的极性不能贸然的迅速提升，因为仪器只能控制当下抽取溶剂的比例。
换言之，仪器对流动相溶剂比例的控制是滞后的，硅胶柱中实际流动相的溶剂比例可能是十几秒、几十秒前的比例。
而液相色谱分离、提纯的原理，主要是利用不同分子结构的物质，在色谱柱中移动所需的溶剂极性的临界值不同。
也就是说，一旦流动相的极性过高，同时达到多种组分的临界值，导致这些组分没有被彻底分开，同时随着流动相向下移动，再同时被收集，就意味着实验失败。
那么就要重新拌样、旋蒸、填柱子、过柱子了。
这台液相色谱仪同时只能处理一根柱子，所以许秋在操作的时候，韩嘉莹去把另外两个样品填入小样品柱，完成装样。
之后她没事可做，便搬了个圆凳坐在他旁边围观。
随着时间的推移，A、B溶剂中B的体积分数缓慢提升。
“师兄，还没反应啊，二氯甲烷都20%多了，还一动不动的。”
“这说明极性还是不到位，慢慢升吧。”
“感觉过柱子好费溶液呀。”看着旁边溶剂桶的液面已经微微下降，韩嘉莹吐槽了一句。
“是啊，而且是带有反应产物的混合溶剂，想重复利用也比较麻烦，最多用来洗一洗瓶子，”许秋笑了笑，“不过二氯甲烷和石油醚，每种都订了四桶，乙酸乙酯订了两桶，肯定是够用了一段时间了。”
又过了一会儿，当软件上实时显示着当前B%为32%时，空白硅胶柱中终于出现了一抹红色，紫外检测器中也出现了明显的信号。
“动了，它动了。”
“嗯，准备干活。”许秋将B%维持在30%。
硅胶柱中，那一抹红色慢慢的变为一团红色，接着又变为一条红色。
当红色的头部到达空白色谱柱的下端后，许秋将收集模式从废液模式改为工作模式。
淡红色的溶液随着一根针头喷射入试管架上的1号试管中。
十几秒后，1号试管装满，针头自动移动至2号试管的位置，继续喷射……
许秋也没闲着，他用毛细管蘸取了少量1号试管中的溶液，然后用石油醚：二氯甲烷1:1配比进行点板。
他对比了此次点板的结果和上午的结果。“只有一个样品点，而且还很浅，从位置来看，是那个主要产物的。”
韩嘉莹则指了指上方的针头。“这边溶液喷的好快，感觉没过多长时间，一跟试管就装满了。”
“我们用的是高压液相色谱，流速是30毫升每分钟，换算一下，一个试管的容积大约10毫升，差不多一分钟四管左右吧，而普通的液相色谱通常仅为1毫升每分钟，效率差了几十倍。”许秋笑了笑道：
“现在的压力只有30多个大气压，这台仪器的最大承载压力可达100大气压，对应的极限流速大概在60毫升每分钟。”
“差距这么夸张呀，”韩嘉莹疑惑道：“那这样的话，不会降低分离效果吗？”
“因为我们只有两个样品点，而且它们的分离程度比较高，所以并不用担心这个问题。”许秋解释道：“之后如果涉及比较难以分离的样品，可以适当的降低流速，提高分离效果。”
……
随着溶液继续喷射，后面试管中液体的颜色也越来越红。
第一次实操，许秋比较谨慎，每隔五个试管点一次板，判断试管中的组分是否纯净。
幸运的是，均只有一个样品点，而且在硅胶板上的爬升位置也都一致，表明是同一种产物。
二十多分钟后。